牛磺酸对生长因子的表达

牛磺酸对高糖刺激细胞和表达的影响 (1)

2011-02-28 10:25:15  作者：  来源：互联网  文字大小：【大】【中】【小】

简介：摘要】 目的 通过检测高糖和牛磺酸培养对大鼠视网膜Müller细胞中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF) 和牛磺酸转运蛋白(taurine transporter，TauT)表达的影响，探讨牛磺酸保护糖 ...

定制论文

发表论文

摘要】  目的 通过检测高糖和牛磺酸培养对大鼠视网膜Müller细胞中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF) 和牛磺酸转运蛋白(taurine transporter，TauT)表达的影响，探讨牛磺酸保护糖尿病引起视网膜损伤的机制。方法 实验分6组，分别是正常对照组、牛磺酸对照组、高糖模型组、低、中、高剂量牛磺酸处理高糖组。用免疫细胞荧光双标鉴定Müller细胞，RTPCR和免疫细胞荧光双标检测Müller细胞中VEGF和TauT的表达。结果 体外25 mmol/L 高糖培养使Müller细胞VEGF mRNA及蛋白表达增加。10 mmol/L牛磺酸可有效抑制高糖诱导的VEGF上调表达(P<0.05);高糖诱导Müller细胞中TauT表达抑制，引起TauT mRNA及蛋白表达明显下降。牛磺酸干预可上调Müller细胞中TauT的表达(P<0.05)，提高细胞内外牛磺酸的转运能力。结论 体外高糖培养诱导Müller细胞VEGF表达增加，TauT表达下降。牛磺酸通过降低VEGF表达、提高牛磺酸转运能力达到保护视网膜的作用。该实验结果可为牛磺酸用于糖尿病早期视网膜病变的防治提供重要的实验依据

【关键词】  牛磺酸; 高糖; Müller细胞; 血管内皮细胞生长因子

       【Abstract】 Objective To investigate the effect of taurine on expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and taurine transporter (TauT ) in rats retinal Müller cells cultured with high glucose and observe the protection mechanism of taurine against diabetic retinopathy. Methods The cells was divided into normal control group (Control), taurine control group (Tau ), high glucose group (HG) and high glucose plus different dosage taurine group (HG+LTau, HG+MTau and HG+HTau). The morphologia were identified by confocal microscopy. The changes of VEGF and TauT expressed in Müller cells were studied by immunofluorescence staining method in a qualitative way and RTPCR in a quantitative way. Results High glucose could significantly increase the expression of VEGF in Müller cells (P<0.05). 10 mmol/L taurine intervention could significantly inhibite the upregulation of VEGF in Müller cells induced by high glucose (P<0.05). Our study also suggested that the expression of TauT reduced in high glucose group and could be stimulated by taurine supplementation (P<0.05). Conclusion Our studies reveal that taurine ameliorates diabetic retinopathy possibly via decreasing the expression of VEGF in Müller cells, increasing the ability of taurine transporter of Müller cells, which suggest a possible utility of taurine as an adjuvant therapeutic agent in the management of diabetes and its complications.【Key words】 taurine; high glucose; Müller cells; vascular endothelial growth factor

　　视网膜 Müller细胞是一种特化的神经胶质细胞，具有维持视网膜的正常结构、营养视网膜神经元、参与构成血视网膜屏障等多种生理功能，而且还参与视网膜的多种病理生理过程。各种原因导致的视网膜损伤会引起Müller细胞功能异常。常见的引起Müller细胞功能异常的因素有：视网膜缺血缺氧、视网膜机械和光损伤、免疫损伤和糖尿病视网膜病变等[1]。血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一种特异性的血管生长调节因子，与血管的形成和增生密切相关。视网膜损伤可诱导VEGF的释放增加，这种VEGF释放增加主要是由Müller细胞分泌的。增加的VEGF通过作用于视网膜血管内皮细胞上大量高亲和力受体，促进血管内皮细胞的分裂、增殖，进而导致视网膜新生血管的生成[24]。牛磺酸是视网膜组织中含量较高的一种游离氨基酸。以往的研究表明，牛磺酸在视网膜中具有多种复杂的生物学效应。视网膜是通过血视网膜屏障来富集牛磺酸的，牛磺酸脂溶性差，通过细胞膜的速度较慢，但其在视网膜细胞内外的浓度差可达 400∶1，这是由于视网膜细胞上存在大量牛磺酸转运蛋白(taurine transporter，TauT)，所以牛磺酸能很快进入

[1] [2] [3] [4] [5]

责任编辑：lw66

定制论文

发表论文

本文引用地址： http://www.dingzhiwang.com/article/2011/0228/article_3929.html

·  上一篇：针灸对小鼠嗅球神经干细胞向胶质细胞分化的影响

·  下一篇：应用基因芯片研究过表达对胃癌细胞免疫相关基因表达的影响

牛磺酸对糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物和转化生长因子-β表达的影响

Effects of taurine on advanced glycosylation end products and expression of TGF-β in renal cortex of diabetic rats

查看全文 下载全文

导出

添加成功！
您可以在“我的服务”中查看您添加的引用通知列表，并且配置获取通知的方式。

关闭

下载PDF阅读器

摘要：

目的 研究牛磺酸对糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物(AGEs)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响.方法 链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠接受牛磺酸处理14周后,用免疫组织化学方法检测肾小球Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和AGEs蛋白的表达,荧光分光光度法测定肾皮质AGEs含量,肾皮质TGF-β1 mRNA转录用Northern杂交检测.结果 糖尿病大鼠肾小球细胞外基质(ECM)主要成分表达和AGEs蛋白形成以及TGF-β1 mRNA转录均明显高于对照组.糖尿病大鼠用牛磺酸处理后上述各参数均明显降低,肾皮质升高的AGEs含量也明显下降.结论 糖尿病大鼠肾小球ECM合成、AGEs形成和TGF-β基因表达明显增加,牛磺酸可能通过降低AGEs形成和TGF-β基因表达抑制肾小球ECM合成.

牛磺酸烧伤内质网应激心肌损伤基因表达

摘要:牛磺酸Tau是心肌中含量最丰富的游离氨基酸，具有抗炎和抗氧化等作用，是一种很好的内源性细胞保护剂本课题组就牛磺酸对心肌的保护作用进行了系列研究，研究发现①牛磺酸能降低烧伤大鼠心肌和血浆中TNF-α，从而降低炎症反应②牛磺酸能清除自由基，调节胞内钙稳态，对心肌线粒体结构功能损伤有明显保护作用③牛磺酸能调节凋亡相关基因表达而降低心肌细胞凋亡为深入探讨牛磺酸对严重烧伤早期心肌损伤相关基因表达及其信号转导通路的影响，本课题设计通过细胞水平、分子生物学水平、动物实验三个层面，在以往的研究基础上，深入了解牛磺酸抗心肌细胞炎症凋亡损伤、保护心肌细胞的作用及可能机制该研究的完成可拓宽牛磺酸在临床上的应用，且可为严重烧伤早期如何保护心脏，减少心肌损害及恢复心功能提供新的思路和途径，推动烧伤后心肌损害防治药物的研究开发与应用 第一部分体外研究牛磺酸对心肌细胞损伤相关基因表达调控的研究 目的在缺氧复合烧伤血清作用的心肌细胞上，观察不同缺氧时间段，HIF-1α、p38激酶、GRP94基因表达的变化及其与肌钙蛋白、TNF-α水平的相关性，并同时观察牛磺酸的影响对比观察p38激酶抑制剂SB203580及牛磺酸对HIF-1α基因表达的影响试图阐明烧伤后心肌细胞炎症凋亡相关基因表达与心肌损伤的影响，阐明牛磺酸对烧伤后这些相关基因表达与释放的调控机制及其在相关的细胞信号转导途径的作用位点，深入研究牛磺酸保护烧伤后心肌细胞的作用机制方法 新生乳鼠原代心肌细胞由胰酶消化法获得，本部分实验主要为 1、建立缺氧复合烧伤血清心肌细胞损伤模型实验分为常氧培养组、单纯缺氧组、缺氧复合烧伤血清组观察本实验设计的缺氧复合烧伤血清培养心肌细胞在缺氧1h、3h、6h、12h、24h五个时间点心肌细胞损伤的情况倒置相差显微镜下观测各组心肌细胞搏动的频率和节律，用ELISA法测定各时相细胞培养液心肌肌钙蛋白，并与单纯缺氧及常氧培养的细胞对比，以确立缺氧复合烧伤血清刺激心肌细胞的损伤程度，建立缺氧复合烧伤血清培养心肌细胞损伤模型 2、研究相关基因的表达变化与心肌细胞损伤的关系及牛磺酸的影响实验分组为缺氧复合烧伤血清组、牛磺酸组、SB203580组、SB203580+牛磺酸组对比观察p38激酶抑制剂SB203580、牛磺酸、牛磺酸+SB203580对缺氧复合烧伤血清培养的心肌细胞搏动频率和节律、细胞存活率MTT法等的影响用RT-PCR检测HIF-1α、p38激酶、GRP94的mRNA水平，并用Western blot法半定量检测HIF-1α、p38激酶、磷酸化p38激酶水平，明确缺氧复合烧伤血清刺激心肌细胞时，这些基因的表达变化与心肌细胞损伤的关系及其牛磺酸的影响，同时观察心肌细胞HIF-1α、p38激酶表达与TNF—α、心肌肌钙蛋白的关系，试图探讨牛磺酸对炎症相关基因表达的具体作用环节观察牛磺酸对GRP94表达的影响，初步探讨牛磺酸对烧伤后心肌细胞内质网应激相关基因的影响 结果 1、单纯缺氧培养1h心肌细胞搏动频率加快、强度增强缺氧3h搏动频率减慢，节律较整齐缺氧6h大多数细胞搏动浅慢，节律不整齐缺氧12h绝大多数细胞已无搏动，极少数浅慢搏动，细胞贴壁较好缺氧24h有较少的存活细胞，培养液心肌肌钙蛋白水平在缺氧3h以后即有显著性升高，提示心肌细胞出现损伤性改变缺氧复合烧伤血清培养的心肌细胞缺氧1h、3h搏动频率与单纯缺氧类似但缺氧6h细胞搏动频率及强度明显下降缺氧12h绝大多数细胞无搏动，有少数细胞脱落，大多数细胞贴壁较差缺氧24h无存活细胞心肌肌钙蛋白水平缺氧3h后各时相点均比单纯缺氧组高，提示缺氧复合烧伤血清培养心肌细胞比单纯缺氧培养的心肌细胞损伤严重，即建立缺氧复合烧伤血清培养心肌细胞损伤模型为便于研究出发，缺氧复合烧伤血清心肌细胞培养合适的缺氧时相为1h、3h、6h、12h 2、缺氧复合烧伤血清组HIF-1α、p38激酶、GRP94表达在缺氧早期1h即上调，缺氧3h明显增高，HIF-1α缺氧6h、12h为高峰p38激酶6h达高值，12h表达量仍在高值GRP94基因表达缺氧12h达高值，培养液肌钙蛋白水平、TNF-α水平与上述基因的表达呈正相关，提示这些基因在烧伤后心肌细胞应激起着一定的作用，持续高表达启动心肌炎症反应引起心肌的严重损伤 3、牛磺酸组各时相心肌细胞搏动频率与缺氧复合血清培养心肌细胞相比较，除缺氧1h相似之外，其余时相心肌细胞搏动频率、强度均比单纯缺氧复合烧伤血清培养心肌细胞快和强度大，缺氧12h存活细胞明显增多，而培养液心肌肌钙蛋白水平、TNF-α则较后者低，HIF-1α、p38激酶蛋白水平降低，提示牛磺酸对心肌细胞保护作用与HIF-1α、p38激酶表达相关 4、p38激酶抑制剂SB203580与单牛磺酸组在细胞搏动频率及培养液肌钙蛋白水平、TNF-α水平、HIF-1α、磷酸化p38激酶的蛋白水平无明显差异，而SB203580+牛磺酸组与上述两组有明显差别，提示牛磺酸有拮抗p38激酶活性，并且可能是影响HIF-1α的活性的原因 5、半定量RT-PCR检测结果显示，牛磺酸组细胞较缺氧复合烧伤血清培养心肌细胞GRP94的表达量有显著性下降提示牛磺酸下调烧伤后内质网应激相关基因的表达 结论 1、烧伤后的心肌细胞损伤不单纯是由于缺氧所致，烧伤早期血清存在着损伤心肌细胞的成分并且是烧伤后心肌细胞损伤的原因之一 2、炎症损伤是心肌损伤的重要原因，心肌细胞的本身是炎症的策源地 3、在体外缺氧复合烧伤血清培养的原代心肌细胞损伤模型上，证明了炎症因子释放相关的HIF-1α、P38激酶基因持续高表达是烧伤后心肌细胞损伤的因素 4、初步证明了内质网应激相关基因GRP94表达参与了烧伤后心肌细胞的损伤过程，其持续高表达是烧伤后是心肌细胞损伤的因素 5、牛磺酸可下调上述基因的表达，下调p38激酶的表达主要在翻译后水平，下调HIF-1α表达的机制可能是通过拮抗p38激酶活性，影响MAPK级联信号通路中p38途径 第二部分体内研究牛磺酸对内质网应激介导大鼠烧伤后心肌损伤相关基因表达的影响 目的近年国内外学者重视内质网应激ERS的研究，但内质网应激参与心肌缺血再灌注损伤的研究相对较少，特别是探讨内质网应激与烧伤后心肌细胞损伤的研究尚未见报道烧伤后心肌细胞ERS特点，牛磺酸对严重烧伤后心肌细胞ERS有何影响尚未见报道本实验探讨严重烧伤后心肌细胞的ERS特点、过度ERS与心肌细胞损伤的关系、观察心肌细胞损伤时内质网应激蛋白表达的改变及牛磺酸对其影响的分子机制，为牛磺酸在烧伤心肌损害防治中的应用提供了实验依据 方法 1.建立大鼠30％TBSAⅢ度烫烧伤动物模型 2.HE染色普通光学显微镜观察烧伤后及牛磺酸治疗后心肌组织形态变化 3.用放射免疫和酶联免疫法观测烧伤大鼠在伤后血浆和心肌中cTnT、TNFα含量的变化及牛磺酸的影响 4.用免疫组织化学方法分析大鼠心肌NF-KB、MAPKp38蛋白表达情况 5.RT-PCR测定GRP94、caspase-12基因的表达变化 结果 1.通过HE染色观察发现烧伤后心肌组织严重损伤，经牛磺酸治疗后损伤减轻 2.放射免疫和酶联免疫法观测发现烧伤后血浆和心肌中cTnT、TNFα含量上升，牛磺酸治疗后两指标含量下降 3.免疫组化分析表明烧伤后NF-KB、MAPKp38迅速增加，伤后6h达峰值，伤后24h仍高于对照组牛磺酸治疗组心肌NF-κB，MAPKp38水平较烧伤组有显著性降低 4.半定量RT-PCR检测结果显示，烧伤1h后GRP94、Caspase-12的较对照组有所升高，12h后达高峰，而牛磺酸治疗组两基因的表达量较烧伤组有显著性下降 结论 1.严重烧伤后心肌GRP94和Caspase-12表达明显升高，表明严重烧伤后心肌存在内质网应激反应，且内质网应激参与了烧伤后心肌损伤 2.牛磺酸对严重烧伤后内质网应激介导的心肌损伤具有较好的保护作用，其分子机制主要是通过下调GRP94及内质网相关性死亡途径中Caspase-12的表达及其活性等
标题:牛磺酸烧伤内质网应激心肌损伤基因表达
专业:外科学烧伤
学位:博士
单位:南昌大学医学院@
关键词:牛磺酸　烧伤　内质网应激　心肌损伤　基因表达　
论文时间:2008
分类:R644
导师:万福生
语种:中文文摘
URL:牛磺酸烧伤内质网应激心肌损伤基因表达
来源:数字图书馆 http://dris.hust.edu.cn/view/10767296189.html

牛磺酸烧伤烫伤肝功能抗氧化

羊皮自体皮混合皮肤移植血管形成环氧化酶-2血管内皮生长因子免疫组化法

烫伤延迟复苏Ia抗原胸腺肽α1卡巴胆碱免疫功能障碍动物模型抗炎效应

卡巴胆碱烧伤口服补液盐脏器功能动物模型

人表皮细胞整合素β1启动子HaCaT

重度烧伤微量元素血清尿液

创伤迷走神经胆碱能抗炎通路

创面愈合表皮干细胞创伤模型免疫组

牛磺酸对糖尿病大鼠周围神经病变的保护作用

作品认领

作者：叶仁群 陈泽奇 贺钰磊 李玉红 所在机构：中南大学湘雅医院中西医结合研究所 长沙410008

核心期刊论文发表！（点击进入） 国家级期刊快速发表（点击进入）

摘要：目的研究牛磺酸对糖尿病大鼠坐骨神经结构、功能以及神经生长因子mRNA表达的影响。方法54只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、牛磺酸组和正常对照组，每组各18只。大鼠于禁食12h后，一次性腹腔注射1％链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型；72h后尾静脉采血测定血糖水平，〉16．7mmol/L者纳入实验。模型制备后第8周末于光学显微镜和电子显微镜下观察坐骨神经形态改变。同时行逆转录聚合酶链反应半定量分析神经生长因子mRNA含量；化学比色法检测血清丙二醛含量；采用MS302多媒体生物信号系统分别记录模型制备后第4周、8周时大鼠坐骨神经运动神经传导速度。结果（1）与模型组相比，牛磺酸对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的体质量和血糖水平无明显改善（P〉0．05）。（2）与正常对照组相比，模型组和牛磺酸组大鼠在注射链脲佐菌素后第8周血清丙二醛水平明显升高（均P〈0．01），但牛磺酸组低于模型组（P〈0．01）。（3）与正常对照组相比，模型组大鼠坐骨神经运动神经传导速度在制模后第4周、8周明显减慢（均P〈0．01）；同期牛磺酸组与模型组间差异亦有显著性意义（均P〈0．05）。（4）病理观察显示，模型组和牛磺酸组大鼠在注射链脲佐菌素后第8周均表现为明显的损伤反应，但牛磺酸组病变程度较轻。（5）与正常对照组相比，注射链脲佐菌素后第8周模型组大鼠神经生长因子mRNA表达水平显著下降（P〈0．01），牛磺酸组表达水平高于模型组（P〈0．01）。结论牛磺酸对糖尿病周围神经病变的防治作用不是直接通过降低血糖水平，而可能是通过有效清除自由基，减轻脂质过氧化，上调神经生长因子mRNA表达而改善神经损伤实现的。