酷开电视机质量如何:如何溶解稀释引物

来源:百度文库 编辑:九乡新闻网 时间:2024/04/28 16:48:42
◆干粉引物溶解稀释方法:

     收到引物后,在开启离心管盖前在12000转/分钟的转速下离心5分钟,以防开盖时引物干粉散失。引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如果对实验的重复性要求较高,合成的OD数较大,建议分装,避免反复冻融。引物一般配制成10-100pmol/ul(umol/l)。

三博远志的引物在出厂时都标有1OD 相当于多少umol 的计算结果,进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算:

    稀释成100pmol/ul   1OD 需加水量(ul)=1OD相当于umol 数×10000

     例如,您拿到的引物DNA合成报告单上标有1OD≈0.0035umol ,包装量是1OD/管,如果您希望将引物浓度定为100umol/L,那么只需用35ul无核酸酶的双蒸水将1OD的引物干粉溶解即可。

     ◆液体引物再稀释可用下列公式:

稀释引物要达到的浓度(pmol/ul或umol/l)=母液浓度(pmol/ul或umol/l)×汲取母液的体积(ul)÷(汲取母液的体积(ul)+加水量(ul))

例如,需要上引和下引共2微升,稀释上引物和下引物要达到的浓度均为5um/l,母液浓度均为100 um/l

那么,对于上引物来说5 um/l=100 um/l(或pmol/ul)×汲取母液的体积(ul)÷2微升  汲取上引物母液的体积(ul)=0.1微升

     对于下引物来说5 um/l=100 um/l(或pmol/ul)×汲取母液的体积(ul)÷2微升  汲取下引物母液的体积=0.1微升

     需要的超纯水为2-0.1-0.1=1.8微升

 

如果防止每次都再稀释,那么可以先把母液(上引和下引)稀释成100微升,上引和下引浓度均为5um/l,计算方法如下:

对于上引物来说 5 um/l=100 um/l(或pmol/ul)×汲取母液的体积(ul)÷100微升  汲取上引物母液的体积(ul)=5微升

对于下引物来说5 um/l=100 um/l(或pmol/ul)×汲取母液的体积(ul)÷100微升  汲取下引物母液的体积=5微升

     需要的超纯水为100微升-5微升-5微升=90微升