蒋勋说唐诗在线听:提高代谢产物产量的方

来源:百度文库 编辑:九乡新闻网 时间:2024/04/27 13:59:21
一、提高初级代谢产物产量的方法1、使用诱导物与糖类和蛋白质降解有关的水解酶类大都属诱导酶类,因此向培养基中加入诱导物就会增加胞外酶的产量。如加入槐糖(1,2-b-D-葡二糖)诱导木霉菌的纤维素酶的合成;木糖诱导半纤维素酶和葡萄糖异构酶的生成。2、除去诱导物——选育组成型产生菌更为有效的方法是改变菌株的遗传特性,除取对诱导物的需要,即选育组成型突变株。使调节基因发生突变,不产生有活性的阻遏蛋白;或者操纵基因发生突变不再能与阻遏物相结合,都可达到此目的。3、降低分解代谢产物浓度,减少阻遏的发生高分子的多糖类、蛋白质等的分解代谢产物(如能被迅速利用的单糖、氨基酸及脂肪酸等)都会阻遏分解其聚合物的水解酶的生成。采用限量流加这类物质或改用难以被水解的底物的方法,可减少阻遏作用的发生,而获得较高的酶产量。4、解除分解代谢阻遏——筛选抗分解代谢阻遏突变株5、解除反馈抑制——筛选抗反馈抑制突变株6、防止回复突变的产生和筛选负变菌株的回复突变株诱变产生的高产菌菌,在生产过程中易于发生回复突变,使生产不稳定。双重营养缺陷型产生回复突变的几率很小,易于获得遗传性较稳定的菌株;利用高产突变株对抗生素敏感性的不同,加适量抗生素防止回复株增殖,也是一种方法。7、改变细胞膜的通透性8、筛选抗生素抗性突变株抗生素作用机制多样;筛选抗生素抗性突变株,有可能改变代谢调节,获得过量生产的菌株。9、选育条件抗性突变株其中温度敏感突变株常被用于提高代谢产物产量。如乳糖发酵短杆菌的温度敏感突变株,在30℃生长良好,在37℃生长微弱;但能在富含生物素的培养基中积累谷氨酸,而野生型菌株却受生物素的反馈抑制。在富含生物素的天然培养基中进行发酵时,可先在正常温度下进行培养以得到大量菌体,适当时间后提高温度,可获得谷氨酸的过量生产。10、调节生长速率11、加入酶的竞争性抑制剂单氟乙酸在微生物细胞内可转变为单氟柠檬酸,对乌头酸酶有竞争抑制作用。因此,向培养基中加入单氟乙酸可导致柠檬酸的积累,减少异柠檬酸的生成。 二、提高次级代谢产物产量的方法1、补加前提类似物如青霉素G的生产中,苯乙酰-CoA是限速因子;补加苯乙酸或其衍生物都能增加青霉素G的产量。次级代谢产物形成中并不是所有前体类似物都是限速因子。加入前体提高产量的效果更取决于总体代谢的调节水平。2、加入诱导物:如加蛋氨酸或硫脲可使顶头孢霉增产头孢霉素C。3、防止碳分解代谢阻遏或抑制的发生4、防止氮代谢阻遏的发生:避免使用高浓度的铵盐作氮源以防止氮代谢阻遏的发生,是抗生素工业成熟的经验5、筛选耐前体或前体类似物的突变株加入前体有提高次级代谢产物产量的效果,但过量对菌体又会有毒害;筛选对前体有抗性的突变株,可获得高产。6、选育抗抗生素突变株链霉素、氯霉素、金霉素等多种抗生素都具有抑制产生自身菌体蛋白的能力。一株高产抗生素产生菌,必然应具备对自身所分泌的抗生素的抗性。7、筛选营养缺陷型的回复突变株次级代谢产物都来自初级代谢产物,因此其营养缺陷型的产量一般都很低。但其回复突变型中却有不少获得高产的例子,其机制尚不清楚。