舰娘提督经验:药用山楂有效成分和药材与制剂质量分析概述

    1 有效成分研究

    山楂含有丰富的黄酮类化合物，其中主要成分是槲皮素、牡荆素、金丝桃苷、卢丁等。此外还含有有机酸类、三萜类等多种成分。

    1.1 黄酮类

    主要有牡荆素（vitexin）、牡荆素-4-鼠李糖（vitexin-4-rhamnoside）、乙酰牡荆素-4-鼠李糖苷（ethyl acyl vitexin-4-rhamnoside）、牡荆素-4’，7-双葡萄糖苷（vitexin-4’，7-dual glucoside）、金丝桃苷（hyperin）、2”-O-乙酰基牡荆素（2”-O-ethyl acyl vitexin）、6”-O-乙酰基牡荆素（6”-O- ethyl acyl vitexin）、牡荆素-2”-O-鼠李糖苷（vitexin-2”-O- rhamnoside）、pinnatifida A、pinnatifida B、山柰酚（kaempferol）、7-O- -L-鼠李糖-3-O-β-D-葡萄糖山萘酚（7-O- -L-rhamnose-3-O-β-D-glucose kaempferol）、槲皮素（quercetin）、3-O-β-D-吡哺葡糖槲皮素（3-O-β-D-glucose quercetin）、O-β-D-吡哺半乳糖槲皮素（3-O-β-D-half lactose quercetin）、3-O-β-D-吡哺葡糖（6-1）- -L-鼠李糖槲皮素[3-O-β-D-（6-1）glucose- -L-rhamnose3-quer- cetin]、3-O-p-D-吡喃半乳糖（6-1）- -l-鼠李糖槲皮素[3-O-p-Dhalf lactose （6-1）- -l-rhamnose quercetin]、芦丁（rutin），4”’-O-鼠李糖芦丁（4”’-O-glucose rutin），Pinnatifida C和Pinnatifida D等。

    1.2 有机酸类

    主要有绿原酸（chlorogenic acid）、山楂酸（hawthorn）、熊果酸（ursolic acid）、乌索酸（ursone）、五加皮酸（montanic acid）、咖啡酸（caffeic acid）、对羟基肉桂酸（hydroxycinnamic acid）、对羟基苯甲苹果酸（phydroxy methyl malic acid）、2 ，3β，19 -三羟基熊果酸（2 ，3β，19 - trihydroxy ursolic acid）等。

    1.3 三萜类

    主要有熊果酸（ursolic acid）、桦木素（betulin）、熊果醇（uvao1）等。

    1.4 其他成分

    主要有正三十一烷（hentriacontane）、十六烷酸二十八烷醇酯（hexade-Canoic.octacsanol ester）、二十烷酸三十八烷醇酯（eic-osanic acid，octatriacontyl ester）、二十九烷醇-10（nonacosyl alcohol-1O）、谷甾醇（sitostero1）、双-（5-甲酰基-糠基）醚[biS-（5-formylfurfury1）-eth-er]、胡萝卜苷（daucosterol，lx）、儿茶酚（catechol）、盐酸二乙胺（diethylamine hydrochloride）、山梨醇（sorbitol）等。

    2 药材及制剂质量研究

    对山楂药材与制剂的质量分析研究主要是以黄酮类的含量为依据。方法主要有高效液相、超声波法、大孔树脂法等。

    2.1 药材提取物工艺及质量

    邓光辉等以超声波法进行实验，以适度的乙醇为提取剂，采用亚硝酸钠-硝酸铝分光光度法，测定黄酮提取率，结果发现超声波提取法能提高乙醇提取黄酮的效率，实验范围内最佳工艺为：乙醇浓度50%，超声波作用时间45min，料液为1/25，此时提取率为91.39%。闫磊等以大孔树脂法分离纯化山楂叶，以紫外分光光度法测定的总黄酮含量为指标，用正交试验和单因素考察相结合来考察多个工艺参数，结果发现D101型大孔树脂对山楂的总黄酮有良好的吸附，其吸附分离工艺条件的药液浓度为0.1g/mL、pH 3~4，上样量为4倍柱体积，以1mL/min 吸附速率进行吸附，4.5倍柱体积的80%乙醇洗脱效果最佳。张黎明等以酶解-吸附澄清法提取山楂叶黄酮，用楂叶总黄酮的得率为指标，结果发现采用酶解-吸附澄清法提取山楂叶总黄酮，在固定料液比为1∶20的条件下，酶解温度55℃，酶质量浓度0.15mg/mL，酶解时间125min，酶解pH值5.0；在酸性或近中性的酶液中，先加入ZTC-Ⅱ型天然澄清剂B，在40℃下作用40min等条件上为最优工艺，Chen等用反相高效液相色谱法测定山楂叶及其提取物中2”-O-鼠李糖牡荆素的含量，以四氢呋喃-乙腈-水-磷酸（30∶5∶125∶0.1）为流动相，检测波长为270nm按外标法定量，结果发现2”-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的平均回收率为99.21%。马晶等用超声波提取法，以95%乙醇为溶剂对山楂中熊果酸进行提取，采用双波长λ1=535nm，λ2=650nm方法扫描，发现熊果酸在0.1~5μg范围内具有良好的线性关系，回收率为100.10%。马国等采用HPLC法，以乙腈-四氢呋喃∶0.5%冰醋酸（1∶19） 流动相，同时测定2”-O-牡荆素葡萄糖苷、2”-O-牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素和金丝桃苷的含量，结果平均回收率99.48%以上。黄飞等通过由电子继电器、贝克曼温度计、水银温度计、恒温水浴锅组成的控温油提装置，60~80℃水提，静置至清液到沉淀完全析出，除杂后后测定多糖的含量，结果发现山楂叶粗品多糖KS的得率为2.4%。汤树良等对各产地的山楂药材，利用Symmetry-ShieldWater RP18柱，乙腈-0.5%醋酸水，柱温40℃，进行梯度洗脱，以紫外波长355nm观察，建立指纹图谱，为不同植物来源的山楂药材的鉴别提供发实验依据。

    2.2 制剂质量分析

    孔铭等用高效液相色谱-蒸发光散色法测定复方利咽润喉颗粒中熊果酸的含量，ODS C18为色谱柱，甲醇-水-冰醋酸（83∶17∶0.1）为流动相，发现熊果酸回收率为98.54%，RSD为2.12%，证明该法是测定熊果酸含量的好方法。谷建人对大山楂口嚼片进行了定性定量的研究，采用显微鉴别和薄层色谱法对山楂进行了定性鉴别，能检出相应的显微特征和山楂总黄酮的薄层斑点；采用薄层扫描法对熊果酸进行了检测，含量为0.12~0.59μg，有良好的线性关系，回收率97.7%。谢东用HPLC复方山楂颗粒中橙皮苷的含量，以Kromisil C18柱为色谱柱，甲醇-乙酸-水（35∶4∶61）为流动相，检测波长为283nm，发现橙皮苷在进样量为0.104~5.20μg内平均回收率为98.75%，RSD=1.16%，证明该法具有良好的实用性。朱勇等采用薄层色谱法对复方降脂胶囊中的山楂成分进行检测，按2000年版药典要求，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（20∶4∶0.5）为展开剂，喷以10%硫酸乙醇溶液，结果发现供试品与对照品色谱位置上相应。

    3 结 语

    目前国内对山楂的主要有效成分研究多限于黄酮类化合物，其提取分离技术主要在于高效液相、超声波分离、大孔树脂等法，对其他成分的提取工艺研究较少。山楂药材与制剂在质量分析技术上比较成熟，且有效成分的检查效果也比较好，对各种来源的山楂药材和制剂的质量提供了保证。特别近年来在现代科学的应用下，作为药食两用山楂对心脑血管系统疾病有良好的作用，以其为原料配伍其他中药材生产的制剂及保健品也越来越多，因此完善山楂药材及制剂质量标准的研究有待进一步深入。