九乡新闻网过零丁洋赏析:白细胞分类计数(DC)标准操作程序 - 检验小胖的日志 - 网易博客
来源：百度文库 编辑：九乡新闻网 时间：2024/05/02 06:10:43
白细胞分类计数(DC)标准操作程序
血液检验SOP 2009-12-08 19:46:06 阅读207 评论0 字号：大中小 订阅
一.目的：规范白细胞手工分类标准操作
二.适用范围：适用于镜下白细胞分类
三.支持性文件：全国临床检验操作规程第三版
四.原理：血涂片瑞氏染色分类法
五.仪器：OLYMPUS显微镜
六.试剂：瑞氏—姬姆萨复合染色液
I液：取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加少量甲醇(分析纯)，研磨片刻，吸出上层染液。再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上液。如此连续几次，共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3min，共5天，以后存放一周即能使用。
Ⅱ液：pH6．4—6．8磷酸盐缓冲液，磷酸二氢钾(无水) 6．64g，磷酸氢二钠(无水) 2．56g， 加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。
七.样本要求：静脉采血使用EDTA-K2抗凝。毛细血管采血应擦去第一滴血，以免混入组织液影响结果。
八.操作步骤：
1．采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。
2．推好的血膜在空气中晃动，以促使快干。天气寒冷或潮湿时，应于37C温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。
3．染 色
(1)瑞氏—姬姆萨染色法：平置玻片于染色架上，滴加染液3～5滴，使其迅速盖满血膜，约lmin后，滴加缓冲液5～10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5～lOmin后用水冲去染液，待干。
4、先在低倍镜下浏览全片，了解染色的好坏和细胞分布情况，观测有无异常细胞。
5．选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比值 (百分率)。
6.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。
九.参考范围： 见表l—l—1。
表1—1—1 白细胞分类计数参考值
细胞类别 成人
中性粒细胞
杆状核 0.01-0.05(1%-5%)
分叶核 0.50-0.70(50％～70％)
嗜酸性粒细胞 0.005-0.05(0．5％～5％)
嗜碱性粒细胞 0-0.01 (0％～1％)
淋巴细胞 0.20-0.40(20%～40%)
单核细胞 0.03-0.10 (3％～10％)
十.注意事项：
1．要避免重复计数，玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈曲线移动。
2. 白细胞总数超过20X109／L,应分类计数200个细胞。白细胞数明显减少的血片，可检查多张血片。
3．白细胞形态变化较大，应经常由高年资检验人员进行核实，以减少误差。
4．禁止在计数池内或涂片下用高倍镜作白细胞分类。